塵螨誘導(dǎo)的特異性皮炎模型制備方案

塵螨誘導(dǎo)的特異性皮炎模型制備

背景簡介：

特應(yīng)性皮炎（Atopic Dermatitis, AD）是一種慢性或慢性復(fù)發(fā)性瘙癢性炎癥性皮膚病，這種由T細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞及其他細(xì)胞感染的皮膚病變關(guān)聯(lián)，暗示其潛在的復(fù)雜免疫功能障礙有關(guān)。該疾病病因復(fù)雜，研究者對AD病因大致歸結(jié)為遺傳因素、感染性因素、變應(yīng)原、心理因素等。研究表明,吸入性變應(yīng)原尤其是塵螨(House dust mite)是人和動物AD的一個重要誘因。塵螨引起AD的途徑主要有兩個:通過破壞皮膚屏障直接引起;通過內(nèi)在性吸入塵螨過敏原引起這也解釋了AD患者往往伴隨有哮喘和過敏性鼻炎等其他過敏性疾病的原因。塵螨引起的AD可以通過減少和避免接觸塵螨使AD的臨床癥狀得到改善。

塵螨是一種常見的吸入性過敏原，能夠誘導(dǎo)特應(yīng)性皮炎、哮喘、過敏性鼻炎等炎癥性疾病發(fā)生，主要變應(yīng)原包括Der p1、Der f1和Blo t5等。這些變應(yīng)原可以誘導(dǎo)Th2型免疫反應(yīng)，導(dǎo)致皮膚炎癥和瘙癢能夠通過激活免疫系統(tǒng)引發(fā)AD樣癥狀，表現(xiàn)為皮膚增厚、CD4⁺T和CD8⁺T淋巴細(xì)胞浸潤，免疫學(xué)特點以Th2型免疫為主；且發(fā)現(xiàn)有神經(jīng)纖維出現(xiàn)在肥大細(xì)胞周圍，這可能說明神經(jīng)系統(tǒng)與AD發(fā)病存在一定的關(guān)系。因此該模型可用來研究神經(jīng)系統(tǒng)在AD發(fā)病中的作用。

小鼠特應(yīng)性皮炎模型誘導(dǎo)：(注：以下方案源于文獻(xiàn)，僅供參考)

1．實驗動物：6-8周雌性C57BL/6J小鼠

2. 模型誘導(dǎo)：設(shè)置模型組（HDM）和對照組（NC）分別用粉塵螨和生理鹽水經(jīng)皮膚致敏。

1）麻醉小鼠，電動剃須刀剔去小鼠背部2cm x3cm范圍麻毛發(fā)，用3M透明敷貼反復(fù)粘貼小鼠背部皮膚6次，破壞皮膚屏障。

2）將浸濕了粉塵螨過敏原浸液（10mg/ml,100ul/次）或生理鹽水的濾紙片（1x1cm²）貼敷與小鼠背部皮膚并用無菌紗布固定，持續(xù)貼敷48小時。

3）分別在第1、4、7周經(jīng)皮致敏，2次每周，7周后結(jié)束，處死小鼠，進(jìn)行檢測。處死小鼠前，取眼眶血，用于IgE水平檢測。

3.模型評估

1）皮膚組織病理檢測

模型組小鼠背部皮膚可見明顯的紅斑、結(jié)痂和鱗屑，對照組皮膚基本正常。皮損處組織病理可見模型組小鼠表皮角化不全伴漿痂、、棘細(xì)胞層明顯增厚并伴有真皮層較多炎癥細(xì)胞浸潤。

圖.1 特異性進(jìn)程小鼠皮損及組織病理表現(xiàn)

2）免疫學(xué)炎癥改變

與對照組相比，模型組小鼠外周血總IgE水平升高。，皮損內(nèi)嗜酸細(xì)胞趨化因子表達(dá)顯著升高，皮損處Th2相關(guān)細(xì)胞因子IL-4和IL-13顯著升高。

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