小鼠腎炎模型誘導方案

小鼠腎炎模型誘導方案

免疫復合物腎小球腎炎（IGGN）模型簡介：

腎小球腎炎是指一系列由免疫應答介導的導致腎小球炎癥。膜性腎病和膜性腎小球腎炎是人類腎病綜合征最常見的病因。膜性腎病的特征是由免疫復合物沿著基底膜與內皮細胞之間的間隙沉積，導致基底膜增厚激活補體。激活的炎癥級聯導致腎功能受損，包括蛋白尿和腎功能衰竭。有研究報道用大鼠膜性腎病模型（Heymann腎炎），研究人膜性腎病，盡管Heymann腎炎覆蓋了人膜性腎炎的很多方面，但是使用大鼠作模型有很多缺點。小鼠膜性腎炎模型是研究膜性腎病發病機制和開發靶向治療的重要研究工具。Wayne et al.等研究用cBSA可誘導兔膜性腎病癥狀。另外，已有研究用cBSA在狗、貓、兔等動物成功誘導免疫復合物腎小球腎炎模型。Chen et al,將這一模型用于小鼠，稱為：免疫復合物腎小球腎炎（IGGN）模型。

人的膜性腎病是由免疫復合物沿著基底膜與內皮細胞之間的間隙沉積而引起的。沉積的免疫復合物激活補體，導致基底膜變厚。對于小鼠ICGN模型，用cBSA反復免疫小鼠。帶正電荷的cBSA與帶負電荷的基底膜（GBM）結合。抗cBSA抗體（主要是IgG1）與cBSA產生的免疫復合物，導致人膜性腎病出現多種癥狀，如：基底膜增厚，低蛋白血癥和蛋白尿。這種發病機制，同樣適用在兒童膜性腎病。

操作流程：

動物品系：

Balb/c and ICR小鼠（≥7-8周齡，雄性或雌性都可以）,C57BL/6小鼠不能誘導產生該模型。

乳劑制備：

用cBSA和CFA弗氏佐劑（cat#7008, 1mg/ml）等體積混合

注意：

制備乳劑后請檢測乳劑質量，滴一滴到水中不擴散，說明乳劑質量良好，反之，重新混勻，直到為油包水狀態。

免疫方法

小鼠尾根部皮下免疫100ul乳劑（cBSA 0.1mg）

腎炎誘導

2周后，靜脈注射200ul(400ug) cBSA(2 mg/ml)，每隔一天重復免疫，一共免疫5次。

注意

靜脈注射cBSA，導致小鼠過敏反應，有可能會導致小鼠死亡。為了避免這種情況發生，初次免疫劑量要小一些（50-100ug cBSA）,在隨后的2-5次免疫逐漸增加劑量到400ug。

腎炎評估：

通過檢測小鼠16小時尿中尿蛋白含量評價腎炎嚴重程度。推薦使用chondrex 公司小鼠白蛋白檢測試劑盒（cat#3012）

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